細胞培養是大多數生物實驗室遇到的基本實驗,但不是簡單的實驗。細胞培養包含大學問題。相信每個細胞培養者都遇到過細胞培養的不良狀態。有時細胞狀態不好,不可能做轉染和藥物篩選等實驗。影響細胞培養的因素很多,但第一個因素是選擇合適的細胞培養基。
細胞*培養基是在體內人工模擬動物細胞生長環境,在體外維持細胞存活和增殖的營養基礎。其主要功能是為細胞提供合適的pH和滲透壓,以及細胞自身無法合成的各種營養素。完整培養基是指添加了各種添加劑的培養基,包含培養基的所有成分,能夠滿足特定細胞生長的需要。通常使用成分有限的培養基進行配置,使用前添加一些不穩定成分,如谷氨酰胺、各種補充劑、血清、生長因子或激素。
細胞*培養基的主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。人工合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。這些成分的作用如下:
氨基酸:組成蛋白質的基本單位。不同的細胞對氨基酸有不同的需求,但一些必需氨基酸不能由細胞自身合成,必須由培養基提供。剩余的非必需氨基酸可以由細胞自身合成或通過轉氨作用從其他物質轉化。
葡萄糖:大部分培養基都以葡萄糖作為能量來源之一。
無機鹽:維持培養基滲透壓平衡,參與細胞的代謝活動。
維生素:一種維持細胞生長并在細胞代謝中起重要作用的生物活性物質。它們大多數形成細胞中酶的輔助基團或輔酶。沒有它們,酶將沒有活性,代謝活動將無法進行。維生素分為水溶性和脂溶性。