水通道蛋白ELISA試劑盒是一種特異性檢測試劑盒,用于定量檢測組織或細胞中水通道蛋白的表達水平。該試劑盒采用間接酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的方法,特異性檢測水通道蛋白的抗原抗體反應。在ELISA試劑盒中,抗原先與特異性抗體結合,隨后加入酶標記的二抗與抗體結合,最后加入底物顯色,顏色的深淺與待測樣本中水通道蛋白的含量呈正相關。
水通道蛋白ELISA試劑盒的使用流程:
樣品準備:組織或細胞樣品需用冰冷的生理鹽水或PBS洗滌三次,再用勻漿器將組織破碎或用胰蛋白酶消化細胞,制備成細胞上清液或組織勻漿液。
加樣:將樣品加入ELISA板中,每孔加入100μL。同時設置標準品孔和空白孔。
孵育:將ELISA板置于37℃孵育一定時間,讓樣品與抗原充分結合。
洗滌:用洗滌液將未結合的物質洗去,保證ELISA板中僅存在特異性結合的抗體和抗原。
加酶標二抗:向ELISA板中加入酶標記的二抗,每孔加入100μL。
孵育:將ELISA板再次置于37℃孵育一定時間,讓酶標記的二抗與抗體充分結合。
洗滌:用洗滌液將未結合的物質洗去。
加底物:向ELISA板中加入底物溶液,每孔加入100μL。
測定:用酶標儀測定ELISA板中各孔的光密度值,根據標準品曲線計算待測樣本中水通道蛋白的含量。
水通道蛋白ELISA試劑盒使用要求如下:
試劑盒應從冰箱取出后在室溫下平衡一段時間后再使用。
加樣時應準確、迅速,避免樣品外溢或產生氣泡。
孵育時應注意溫度和時間,以保證抗原抗體充分結合。
洗滌時應保證每孔充分洗滌,避免殘留物影響檢測結果。
加底物時應避免氣泡產生,影響光吸收值。
試劑盒中各組分不得交叉污染,否則會導致檢測結果異常。