源性成分試劑盒是一種用于檢測食品、化妝品和飼料等樣品中動物源性成分的實驗工具。其作用與使用條件如下:
一、源性成分試劑盒作用:
快速準確檢測:利用實時熒光PCR技術,能夠快速準確地檢測出樣品中的牛源性成分。通過設計特異性引物和探針,針對動物種間基因多態性的差異進行鑒定,確保檢測結果的準確性。例如,基于線粒體DNA cytochrome c oxidase subunit I(COX I)基因上的差異,可以區分不同種類的動物源性成分。
監控反應過程:試劑盒中含有內參照(Internal Control),可以監控PCR反應是否正常進行,防止假陰性結果的出現。通過對內參照基因的檢測,能夠判斷反應體系是否受到抑制或存在其他問題,從而提高檢測結果的可靠性。
適用范圍廣泛:不僅適用于黃牛(Bos taurus)的檢測,部分試劑盒還可同時檢測水牛(Bubalus bubalis)、牦牛(Bos grunniens)等其他牛類品種的成分。不過,由于檢測品種不同,擴增序列可能存在變異,某些品種的??赡軣o法被檢出。該試劑盒可應用于食品、化妝品和飼料等多種樣品中牛源性成分的鑒別。
二、源性成分試劑盒使用條件:
分區操作:為了防止污染,實驗要分區操作。通常分為三個區域:①反應液配制區;②樣品制備區;③樣品添加區及反應檢測區。這三個區之間必須進行物理性隔離,避免人為因素造成污染。
試劑處理:2X Premix for Bovine制品融解后,需要上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經輕微離心后使用。Probe Mix for Bovine應避光保存。
配制要求:配制Real Time PCR反應液時應避免強光照射。反應液的配制、分裝請一定使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
溫度控制:一般需要在特定的溫度條件下進行反應,如反轉錄步驟通常在42℃下進行,而PCR擴增則需要在95℃預變性后,進行若干個循環的變性、退火和延伸過程,每個循環的溫度和時間根據具體的試劑盒和實驗要求而定。