人肝星狀細胞
產品名稱 ：人肝星狀細胞
產品貨號 ：YLK-XB0551h
組織來源 ：肝臟組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
肝星形細胞分離自肝臟組織。肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用。肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。
肝臟在機體位置和形態結構 ：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(H SC ) 又名肝貯脂細胞、維生素A 貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質的主要來源。H SC 在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導致肝纖維化的因素均將H SC 作為最終靶細胞。正常情況下，H SC 處于靜止狀態，當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時，H SC 的表型由靜止型轉變為激活型，激活的H SC 可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建，此過程也是肝纖維化的中心環節。
肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內，是合成、分泌細胞外基質的主要來源，在肝纖維化的發生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟te有的間充質細胞，約占肝臟細胞總數的8% -13% 。
作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群，肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外，肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。
細胞特性
1)細胞來源于人正常肝臟組織。本細胞易活化，提供的為激活后的細胞。
2)細胞鑒定：CD95L免疫熒光染色為陽性（靜止狀態）；結蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：長梭狀，星狀細胞，貼壁培養。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：成纖維細胞樣
傳代特性 ：可傳3代左右
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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