小鼠肺小動脈內皮細胞
產品名稱 ：小鼠肺小動脈內皮細胞
產品貨號 ：YLK-XB0961h
組織來源 ：肺小動脈組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
肺小動脈內皮細胞分離自肺小動脈組織。肺動脈干是短而粗的動脈，自右心室的動脈圓錐起始，向左后上方斜升，先在升主動脈根部的前面，繼而至其左側，至主動脈弓的下方，約在第5胸椎高度，分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，橫行向左，經左主支氣管前方至左肺門，分兩支進入左肺的上、下葉。右肺動脈較長，橫行向右，經主動脈升部和上腔靜脈的后方達右肺門，分3支進入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實質內又反復分支，與支氣管的分支伴行，最后達肺泡壁，形成稠密的毛細血管網。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側與主動脈弓下緣之間有一結締組織索，稱動脈韌帶。
管徑在0. 3～1m m 之間，為小動脈（sm all-artery），小動脈包括粗細不等的幾級分支，也屬肌性動脈。較大的小動脈，內膜有明顯的內彈性膜，中膜有幾層平滑肌，外膜厚度與中膜相近，一般沒有外彈性膜?？趶皆?m m 以下的動脈，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質纖維。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素，也是調節微循環灌注量的“總開關"。典型的小動脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚，當平滑肌在神經支配下強力收縮時，其管腔可以wan全閉塞，而使血液不能流入它所分布的毛細血管內，從而增加了周圍血液循環的阻力。如果有許多小動脈同時收縮，可使血壓顯著上升。反之，當小動脈的平滑肌舒張時，則可使大量的血液流入毛細血管，外周阻力明顯下降，血壓降低。終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20～30μm 。后小動脈(m etar-teriole)，又稱毛細血管前小動脈(p recapil-lary arte riole)的口徑為12～15μm 。
管壁內均有較稀疏的平滑肌，在毛細血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphin c-ter)，其收縮或舒張，可調節真毛細血管的血流量，是調節微循環灌注量的“分開關"。支配小動脈平滑肌的交感神經纖維，可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細胞。在毛細血管前括約肌上交感神經纖維特別豐富。肺小動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ：PLL（0. 1m g/ml），明膠（0. 1%）
培 養 基 ：基礎培養基，含FBS、EG F、bFG F、IG F、V EG F、H eparin、H ydrocor
tisone、P enicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：內皮細胞樣
傳代特性 ：可傳1-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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