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大鼠脊髓神經元細胞

簡要描述：大鼠脊髓神經元細胞分離自脊髓組織。脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護。是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。

  • 更新時間：2024-07-10
  • 廠商性質：生產廠家
  • 生產地址：上海
  • 訪  問  量：186

產品分類

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詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB1171h
規格5*10^5供貨周期現貨
主要用途科研應用領域化工,生物產業
組織來源脊髓組織

大鼠脊髓神經元細胞

產品名稱 ：大鼠脊髓神經元細胞

產品貨號 ：YLK-XB1171h

組織來源 ：脊髓組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介：

脊髓神經元細胞分離自脊髓組織。脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護。是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H 形(蝴蝶型) 灰質區，主要由神經細胞構成。在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成。脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經) 分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。

按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節，31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統最基本的結構和功能單位是神經元，即神經細胞，其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起，能在神經元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態各不相同，很難用常規的顯微鏡鑒別。

脊髓組織內含有大量膠質細胞，神經元含量少，分離純化難度大，且脊髓神經元細胞是高度分化的終末細胞，不能分裂增殖，培養要求高。剛接種的脊髓神經元呈圓形，體積小，透亮，無突起。培養2-3d，可見胞體增大，突起增多延長。培養6-7d，細胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網，光暈明顯，立體感強。培養20d后 ，死亡細胞明顯增加，細胞出現內空泡，突起粗細不均，甚至脫壁，發生細胞崩解。


細胞特性

1)組織來源于實驗動物的正常脊髓組織。本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續實驗，不要進行擴增培養。

2)細胞鑒定：NSE免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：不規則細胞，貼壁培養。


質量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

包被條件 ：PLL(0. 1m g/ml)
培 養 基 ：含B-27 Supplem ent、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：神經元細胞樣
傳代特性 ：屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：0. 125% 胰蛋白/酶

培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%


該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。


客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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