大鼠腎上腺皮質細胞
產品名稱 :大鼠腎上腺皮質細胞
產品貨號 :YLK-XB1253h
組織來源 :腎上腺組織
產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介:
腎上腺皮質細胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當重要的內分泌器官,由于位于兩側腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側面觀察,腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分,周圍部分是皮質,內部是髓質。腎上腺內部是髓質部分,分泌腎上腺素和去甲腎上/腺素。這些激素在應激狀態釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動員全身的儲備物質,為機體與外界環境的抗爭作好充分準備。
腎上腺外部是皮質部分,分泌醛固酮、皮質/醇和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數量的醛固酮,對維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌,會導致高血壓和低血鉀。皮質/醇是人體必需的激素之一。當人體處于應激狀態時,比如感冒,發燒,遇到突發事件的時候,腎上腺皮質分泌大量的皮質/醇,這些皮質/醇能夠動員機體的存儲能源,為應對內部或者外部重要事件提供充分的物質準備。當皮質/醇缺乏時,機體在遇到重大事件的時候,往往缺乏足夠應對能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產生的雄激素,對男性來講,并非必bu可少,但是對女性而言,是雄激素的一個重要來源。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腎上腺組織。
2)細胞鑒定:3β-HSD免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:圓形或多角形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 : 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養 基 : 含FBS、生長添加劑、
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態 : 梭形、多角形
傳代特性 : 可傳1-3代左右;2代以內狀態最佳
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。