白介素從分子結構來看,其都是小分子的多肽,多數由一百個左右氨基酸組成。白細胞介素都是通過與靶細胞表面的細胞因子受體特異性結合來發揮其生物學效應,這些效應包括促進靶細胞的增殖和分化,增強抗感染和殺傷腫瘤細胞效應,促進或抑制其他細胞因子合成,促進炎癥過程,影響細胞代謝等。
1、靈敏度:有二層含義,一為試劑檢出被檢物質的低量的能力;二為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
2、特異性:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部分的物質可能存在交叉反應,使測定結果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
3、精密度:一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍。
4、準確度:通過添加回收實驗進行評價。
5、安全性:指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
6、經濟性:試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本,而市場價格比較合理。
白介素ELISA試劑盒的正確使用需要留意以下這些問題?
實驗時,要使底物避光保存。底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。檢測前,要打開酶標儀,使之穩定十分鐘以上。待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。溫浴時間應遵守試劑盒規定。
洗板時,每次洗液加入后,應靜置一分鐘,使清洗更加好。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。